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【摘要】目的探讨微柱凝胶（MGT）法在新生儿及晚期肿瘤患者ABO及RhD血型鉴定中的应用价值。方法采用MGT法、盐水试管法、凝聚胺（MPT）法对我院280例新生儿、98例晚期肿瘤患者进行ABO正反血型鉴定及RhD血型鉴定试验，其中盐水试管法、凝聚胺法借助显微镜判断，根据三种方法的凝集强度、正反定型的相符率进行比较。结果MGT法鉴定ABO血型正反鉴定符合率均高于MPT法和盐水试管法，MGT法与盐水试管法相比差异具有统计学意义（P＜0.05），三种方法在RhD血型鉴定结果一致。结论MGT法在鉴定新生儿及晚期肿瘤患者ABO血型较MPT法及盐水试管法更加敏感准确。三种方法鉴定RhD血型结果一致，但MGT法较其他两种方法操作更加简便、直观，是一种值得临床使用的好方法。
【关键词】：新生儿微柱凝胶法凝聚胺法血型鉴定
中图分类号：R44 文献标识码：B 文章编号：1004-1484（2011）12-0012-02
ABO、RhD血型鉴定对于临床输血、遗传分析和法医学鉴别都具有十分重要的意义，如果鉴定错误可以引起严重后果。由于血型鉴定错误而引起的错误输血将有可能导致受血者死亡[1]。对临床输血工作者而言，新生儿及肿瘤晚期患者由于其红细胞上面血型抗原及血浆中的天然血型抗体较健康成年人差异较大，因此通常容易出现血型鉴定困难。目前临床上血型鉴定方法有盐水试管法、 凝聚胺（MPT）和微柱凝胶（MGT）法。结合我院临床及实验室条件，我科使用上述三种方法对280例新生儿及98例晚期肿瘤患者ABO及Rh血型鉴定并对结果进行统计分析，现报道如下。
1材料与方法
1.1 研究对象
我院2009年10月～2011年5月新生儿科住院患儿280例（年龄：1h～2周，男婴：女婴=158：122），2008年1月～2011年5月肿瘤科收治并确诊的晚期肿瘤患者98例（年龄： 5～18岁，男：女=113：11）。
1.2 试剂与仪器
微柱凝胶血型鉴定卡、A1、B型标准红细胞、抗A、抗B标准血清；抗RhD标准血清均购自长春博迅生物技术有限责任公司，O型红细胞由本实验室采用3名O型健康献血者捐献血液自制。31℃恒温孵育器（瑞士达亚美），血型鉴定专用离心机（长春博研科学仪器有限责任公司），凝聚胺试剂盒（珠海贝索生物技术有限公司）。
1.3 实验方法
1.3.1 盐水法。参照《全国临床检验操作规程》[2]，即正定型：取受检者5％的红细胞型悬液50L，抗A、抗B、抗D血清各100混匀，3200r／min离心15S，显微镜下观察结果，镜下凝集者判为阳性。反定型：取试管两只，依次加入患者血浆100，再分别加入反定型Al、B细胞，离心后观察结果，镜下凝集者判为阳性。
1.3.2 凝聚胺法、微柱凝胶法。严格按照产品说明书操作，并使用厂家配套的离心机、孵育器。
1.4 统计学方法
实验所得的数据采用SPSS 13.0软件包进行分析。ABO血型正反鉴定符合率的比较采用x2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
三种实验方法对于两组受检者ABO正反鉴定符合率见表1。在新生儿组MPT法ABO正反定型符合率明显高于盐水法（X2=24.48，P＜0.01），MGT法ABO正反定型符合率也明显高于盐水法（X2=40.41，P＜0.01），MGT法正反定型符合率较MPT法有所升高，但差异雅统计学意义（X2=2.10，P=0.08 ）；在肿瘤患者组MGT法ABO正反定型符合率也明显高于盐水法（X2=11. 8，P＜0.01），MGT法ABO正反定型符合率也明显高于盐水法（X2=1 .53，P＜0.01），MGT法正反定型符合率较MPT法有所升高，但差异雅统计学意义（X2=0.4 9，P=0.304）。由表2，可见全部受检者均为RhD阳性，且用三种方法均可以检测出受检者红细胞表面的RhD抗原。
3讨论
准确的血型鉴定是临床输血安全的重要保证，在临床上存在着不少患者血型鉴定困难的情况，这是广大临床输血工作者面临的较大的难题。结合笔者的工作经验及相关文献报道发现，血型鉴定困难主要集中在新生儿和肿瘤患者。排除人为差错等原因外，实验方法对于血型鉴定起到了至关重要的作用。因此本实验采用了三种临床上较常用的试验方法，对2周以内的新生儿以及临床确诊的晚期肿瘤患者进行ABO及Rh血型研究。
通过研究发现，三种方法对于新生儿及晚期肿瘤患者ABO血型鉴定的正反鉴定符合率均未达到100%。就其原因，对新生儿而言，与其出生后在其个体发育过程中红细胞表面抗原不足、 抗体产生量少或不产生有关。一般认为新生儿的A、B抗原数量约为成人的30%左右，而人体天然血型抗体为IgM，但不同个体因其母体所处外环境、遗传背景的差异，受到天然血型物质刺激的程度和强度有所差异。且不同个体对天然血型物质的免疫应答也不同，从而使部分婴儿不产生天然血型抗体或其效价极低，不与相应红细胞产生可见的凝集反应[3] ；对晚期肿瘤患者而言，由于患者机体各方面机能都严重下降，尤其是免疫功能低下，因此与正常人相比其血浆中的血型抗体也较正常人明显降低，另外其红细胞表面A、B抗原也会减少[4]，因而出现ABO血型正反定型不符合的情况。而由于Rh血型抗原表位与A、B抗原表位不同，在胎儿出生时已发育成熟并且与相应的抗体亲和力较强，因此在新生儿及晚期肿瘤患者未发现明显变化，三种方法均可完全检测出来。
通过对ABO血型正反定型符合率的比较分析，发现在新生儿及晚期肿瘤患者血型鉴定中，MGT法与MPT法正反定型符合率较盐水法明显提高，差异具有统计学意义（P＜0.05），并且MGT法较MPT法与盐水法凝集现象更加明显易于肉眼观察。尽管MGT法与MPT法比较，差异不具有统计学意义，但是由于MGT法是建立在传统的血型血清学方上的一项免疫学检测技术。该技术重复性特异性强，且操作简便（雅需显微镜观察），易于规范化和标准化等特点[5]特别是由于该方法把血型血清学技术、分子筛技术结合起来，使得其对抗原较弱的婴幼儿、及晚期肿瘤患者血型检测较MPT法更表现出其优越性。在目前流式细胞技术ABO血型基因检测技术尚未全面推广的条件下，MGT法不失为一种检测新生儿和晚期肿瘤患者血型鉴定的好方法。
参考文献
[1]周英,张旌,何萍,等.临床输血差错原因分析[J].当代医学,2008,149:93～94.
[2]叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程[M].第三版,江苏:东南大学出版社,200 .
[3]杨波.新生儿ABO血型鉴定结果分析[J].中华综合临床医学杂志,200 ,8(5):10～11.
[4]郭豫,窦立君,张玉红.恶性肿瘤患者红细胞血型抗原变化的临床研究[J].中国老年学杂志,2009,29(12):3021～3028.
[5]杨志诚,罗光礼,李萌,等.柱凝胶技术在临床血型鉴定和交叉配血中的应用[J].浙江临床医学,2008,12(10):1 12.
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发表于 2020-7-5 21:42:49
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